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    技術支持

    貝克曼DNA純化試劑盒具體的提取流程是怎樣的
    發布時間:2021-06-21   點擊次數:426次
       實驗室工作中,經常會需要用到純化的DNA,這時我們通常需要使用一個貝克曼DNA純化試劑盒對目的DNA進行分離純化。目前大多數試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解,柱純化,洗滌雜質,柱洗脫。然而,不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。
      貝克曼DNA純化試劑盒提供了從各種來源的細菌培養液(革蘭氏陽性或革蘭氏陰性)中快速簡單地提取基因組DNA的方法;一次可處理<3ml正處于指數生長期的細菌培養液(1x109細菌)。
      該試劑盒采用獨特的DNA吸附柱純化方式,可在60分鐘內同時進行一個或多個樣品的純化工作。純化過程不需要用到酚氯仿抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。
      純化DNA產物可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗。一次抽提可純化出10-30μg的高質量的基因組DNA。此外,貝克曼DNA純化試劑盒還可以抽提得到除基因組以外遺物質,包括質粒,Cosmid,BAC等。
      由于該方法采用溶菌酶(Lysozyme)和玻璃珠(0.1-0.2mm)共同作用來去除細胞壁,因而可高效地裂解細菌,保證DNA的有效回收。對于大多數的陰性或陽性細菌,只需使用溶菌酶。
      從正處于指數生長期的細菌培養液中收集細菌,細菌經溶菌酶去除細胞壁,蛋白酶消化細胞,然后用HiBind硅膠柱結合DNA,經過兩次快速洗滌,最后將DNA溶解在滅菌水或低鹽緩沖液中。

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